关键词：假阳性核酸污染PCR实验室核酸污染鉴别核酸污染清除仪ct值
随着新型冠状病毒肺炎(COVID-19)疫情的爆发和流行，新型冠状病毒(severeacuterespiratorysyndromecoronavirus2，SAＲS-CoV-2)核酸检测已经成为各临床实验室不可缺少的检测项目。大规模爆发和聚集性疫情的产生使得实验室的检测压力出现前所未有的增加。面对检测任务的增加，实验室正常运行是最重要的保障，其中避免实验室污染以及实验室一旦发生核酸污染后的消除也是实验室负责人必须重视的一项内容。
PCR实验室核酸污染如何鉴别PCR实验室假阳性问题不容小觑
假阳性主要来源于实验室环境污染、标本污染、非特异性扩增等。个别假阳性情况能通过复查核酸或重新提取后纠正过来。如出现一些特殊情况，如一个96孔板中有很多阳性，或重复测试仍为阳性，但这种检测结果和流行病学或临床不符，就必须考虑是实验室本身的问题。
筛查为主的核酸检测机构出现检测假阳性主要是阳性质控品造成的，包括含待测基因的质粒或假病毒。对于收治确诊患者的定点医疗机构或接触入境阳性人员的实验室，如实验操作不当等原因，阳性样本发生溢撒或产生大量气溶胶，可使周围环境被病毒污染。实验室一旦发生核酸污染，检测工作必须紧急停止，直到确定消除污染后才能重新开始检测。
发生核酸污染后需要第一时间查找污染源和污染原因，明确原因后才能采取有效的去污染措施。当实验室出现污染后，能及时鉴定出污染类型，从而缩小并明确造成污染的原因，使得检测工作尽快恢复。
核酸污染清除仪核酸污染类型鉴别
由于实时荧光ＲT-PCＲ方法通常无法区分所检测核酸片段的类型，通过结合去除反转录步骤以及使用DNase两种处理方式比较前后结果的变化来鉴别核酸污染类型。
1.去除反转录步骤结果无变化，DNase处理后结果阴性，可鉴定为DNA类型污染：
2.去除反转录步骤结果阴性，DNase处理后无变化，可鉴定为ＲNA类型污染;
3.去除反转录步骤结果阴性，DNase处理后Ct值增高或结果为阴性，可鉴定为ＲNA类型污染(模板被DNase稀释所致);
4.单独通过去除反转录步骤、DNase处理步骤后结果为阳性，说明存在DNA和ＲNA两种类型共同污染。
核酸检测具有灵敏度高、特异性好的特点，但对于核酸检测结果的准确性，需要从多方面因素来保证。由于核酸检测阳性结果被视为SAＲS-CoV-2感染诊断的金标准，阳性结果的报告直接决定相关疫情的后续处理，因样本在实验室受污染而导致“阳性”的情况在很多实验室都出现过，而假阳性情况则会造成人员恐慌以及流行病学调查和防控措施过度等问题。除了考虑实验室生物安全、风险评估等措施，根据SAＲS-CoV-2核酸检测的基本原理和条件，从检测样本采集、运输、保存的方式，试剂盒的质量，以及临床实验室的管理等多方面，鉴定出污染类型的工作也是应对实验室检测“假阳性”的重要工作之一。
PCR实验室假阳性问题如何预防？
核酸气溶胶与PCR过程相伴相生，污染来的悄无声息，防不胜防，假阳性结果让无数生物学子奔溃与抓狂，那究竟该如何应对？
第一：自我防护是关键，相对于一线的医生，检测人员的防护服、口罩、防护镜等一个也不能少；《新型冠状病毒实验室生物安全指南》中就指出病毒抗原检测、血清学检测、核酸提取、生化分析，以及临床样本的灭活等操作，应当在生物安全二级实验室进行，同时采用生物安全三级实验室的个人防护。
第二：每次检测实验前后，都要使用专业的核酸气溶胶污染清洁剂，对检测台面、核酸提取仪、PCR仪、手持移液器、离心机、振荡器、空气、门把手、地面、墙壁等位置进行彻底清楚残核酸留气溶胶和潜在污染源，保证检测样本的准确性和检测人员的安全性。
第三：加强气溶胶污染的监测工作。通过专业监测试剂盒对医疗场所和检测场所都进行定期监控，做好防护，一旦发现医疗场所检测出阳性样本，应及时暂定场所的使用。
有着不少实战经验的润联认为最重要的是对PCR实验室进行消毒、气溶胶清除等措施，尽可能防止病毒通过场所间接扩散；据计算一个气溶胶颗粒可含拷贝，因而由其造成的污染是一个非常重要而被忽视的污染源，严重的将影响疫情的诊断和防治工作，所以说污染监测刻不容缓。
PCR实验室核酸气溶胶清除方案如何选择，评定核酸气溶胶核酸污染去除技术是否有效的核心是什么？
比林科汉核酸污染去除仪搭配诺沃赛德核酸清除液能够有效清除空气中残余病毒，细菌，DNA,RNA及残留试剂，够清除空气中的气溶胶DNA/RNA,清除效率达到99%以上；独特的杀菌机理可以保证产生的颗粒杀灭支原体，接近气体的覆盖可以保证将隐藏在各处的支原体污染源根除,消毒干雾无孔不入，专门对付小分子污染源物质；能高效分解DNA、RNA污染源及核酸酶等分子物质；效果好，能彻底杀灭环境中的MRSA、VRE、结核分枝杆菌、芽孢、病毒和多重耐药的革兰阴性菌（鲍曼不动杆菌）实现更快速的密闭空间清洁消毒措施，预防实验室环境空气污染及气溶胶污染，及快速高效去除实验室气溶胶污染源。
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